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土壤脲酶活性测定操作步骤

2026-02-03

  土壤脲酶(Urease)活性测定是评估土壤氮素转化能力、微生物活性及肥力状况的重要生化指标。脲酶能催化尿素水解为氨和二氧化碳,其活性高低直接反映土壤氮素供应潜力和有机质代谢强度。

  操作步骤

  1. 样品处理

  取 新鲜土壤(勿风干!),过 2 mm 尼龙筛;

  称取 5.00 g 湿土(记录含水量,用于换算干重)。

  2. 酶促反应

  试管中加入:

  土壤 5.00 g

  10% 尿素溶液 5 mL

  缓冲液 5 mL

  对照管:先加 5 mL 甲苯(抑制酶活),再加尿素和缓冲液。

  混匀,37℃ 恒温培养 24 小时。

  3. 终止与显色

  培养后立即加入 5 mL 2.5 mol/L H₂SO₄ 终止反应;

  过滤(干滤纸),取 3 mL 滤液;

  加 3 mL 苯酚溶液 + 3 mL 次氯酸钠溶液;

  室温放置 1 小时(显色完全)。

  4. 比色测定

  以 蒸馏水调零,630 nm 测吸光度(A);

  同时做 NH₄⁺–N 标准曲线(0、0.5、1.0、2.0、3.0 mg/L)。

       来源:网络

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