土壤中谷氨酸脱氢酶(GDH)的测定方法主要基于分光光度法，其原理是GDH催化NADH与α-酮戊二酸反应生成谷氨酸和NAD+，通过监测340nm处NADH吸光度的下降速率计算酶活性‌

　　具体步骤如下：

　　1. ‌样品制备‌

　　称取1.000g新鲜土壤样品，加入预冷的提取液(含Tris-HCl缓冲液、MgCl₂、EDTA和β-巯基乙醇)，冰浴研磨后离心(4℃、16000r/min、30分钟)，上清液即为酶液。

　　2. ‌反应体系配置‌

　　反应混合物包括：0.3mL α-酮戊二酸(0.1mol/L)、0.3mL NH₄Cl(1mol/L)、0.2mL NADH(3mol/L)及1mL酶液，不足体积用Tris-HCl缓冲液补足。

　　3. ‌测定条件‌

　　以340nm波长监测吸光度变化，NADH每分钟吸光度下降0.001定义为1个酶活性单位。

　　需设置对照(缺谷氨酸的反应液)以消除背景干扰。

　　4. ‌质量控制‌

　　‌双试剂设计‌：建议采用双试剂分步反应，先预孵育消除内源性干扰物(如丙酮酸)，再启动主反应以提高准确性‌。

　　‌样品保存‌：新鲜样品需4℃避光保存，避免酶活性降解;挥发性有机物测试样品需用棕色玻璃瓶，保存时间不超过7天‌。

　　5. ‌注意事项‌

　　‌环境控制‌：温度(37℃)、pH(7.4-7.6)需严格优化，避免影响酶促反应效率‌。

　　‌干扰因素‌：高浓度重金属或农药可能抑制GDH活性，需通过加速溶剂萃取(ASE)或QuEChERS法净化样品‌。

       来源：网络