土壤速效钾(Available Potassium)是指土壤中能被植物当季直接吸收利用的钾素，主要包括水溶性钾和交换性钾，是指导钾肥施用的关键指标。其测定采用化学浸提-仪器分析法，核心在于选择合适的浸提剂以模拟根系对钾的吸收。

　　本方法基于经典文献 (Casida et al., 1964; Thalmann, 1968) 及后续改良。

　　1. 主要试剂与仪器

　　试剂：

　　INT溶液： 用去离子水或Tris-HCl缓冲液配制一定浓度(如0.4%或1.0%)的INT溶液，现用现配，避光保存。

　　提取剂： N，N-二甲基甲酰胺 (DMF) 或甲醇-丙酮混合液，用于终止反应并提取INF。

　　INF标准溶液： 用于制作标准曲线。纯品INF昂贵，也可用已知浓度的INT溶液经化学还原(如连二亚硫酸钠)完全转化为INF后配制。

　　氯化钙溶液 (0.5 M) 或 Tris-HCl缓冲液 (pH 7.6-7.8)： 用于调节土壤湿度/离子强度。

　　仪器：

　　恒温培养箱(通常为37°C)

　　振荡培养箱或水浴摇床

　　离心机

　　分光光度计

　　移液器、避光离心管或试管

　　2. 样品准备

　　必须使用新鲜土壤样品!脱氢酶活性对干燥敏感，风干会导致活性大幅下降甚至丧失。样品可短期保存于4°C。

　　去除可见的植物残体和石块，过筛(通常2mm)，并调节至约田间持水量的50-60%。

　　3. 实验步骤

　　关键：全程需避光或在弱光下操作，因INT对光敏感。

　　称样与加液： 称取相当于5-10g干土的新鲜土样于50mL避光离心管中。设置：

　　处理组： 土样 + INT溶液(如5 mL 0.4% INT)。

　　基质对照： 等体积水或缓冲液代替INT溶液(用于校正土壤自身颜色)。

　　试剂空白： 无土，只有INT溶液(检查INT自身变化)。

　　每组至少3个重复。

　　孵育反应： 充分混匀后，塞紧管盖，置于37°C恒温黑暗条件下精确孵育。孵育时间根据土壤活性而定(通常2-24小时)，需通过预实验确定在线性范围内。

　　终止反应与提取： 孵育结束后，立即向每个样品中加入20-25 mL DMF(或甲醇)。剧烈振荡(如30分钟)以充分提取生成的INF。

　　离心与过滤： 在4°C、4000 rpm下离心10分钟，取上清液。若上清仍浑浊，可用滤纸或0.45 μm膜过滤。

　　比色测定： 用分光光度计在490 nm波长下测定上清液的吸光度(OD₄₉₀)。

　　标准曲线： 用INF标准溶液系列在相同条件下测定，绘制吸光度-INF浓度标准曲线。

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