测试土壤微生物呼吸是评估土壤健康和生物活性的一个重要方面，因为它反映了土壤中微生物活动的强度。土壤微生物呼吸指的是土壤中的微生物在分解有机物质过程中释放二氧化碳(CO₂)的量，这直接关联到土壤肥力、碳循环以及生态系统的健康状态。以下是几种常见的测定土壤微生物呼吸的方法：

　　1. 碱液吸收法

　　原理：通过将土壤样品置于密闭容器内，并放置碱液(如0.5M NaOH溶液)来吸收由土壤微生物呼吸作用产生的CO₂。之后，使用酸滴定或自动电位滴定仪测量吸收了CO₂后的碱液，计算出释放的CO₂量。

　　操作步骤：

　　准备若干个带有碱液的小瓶，每个小瓶放入等量的新鲜土壤样品。

　　将瓶子密封并在恒温条件下孵育一定时间(通常为24小时至数天)。

　　孵育结束后，取出碱液并用酸进行滴定以确定吸收了多少CO₂。

　　2. 红外气体分析法(IRGA)

　　原理：利用红外气体分析仪直接测量从土壤样品中释放出来的CO₂浓度。

　　操作步骤：

　　土壤样品被放置在一个封闭的室中，该室连接到一个能够实时监测CO₂浓度变化的IRGA系统。

　　在控制温度和湿度的条件下，记录一段时间内的CO₂排放速率。

　　3. 气相色谱法

　　原理：与IRGA类似，但使用气相色谱仪(GC)来精确测定CO₂浓度。

　　操作步骤：

　　同样需要将土壤样品放在密封容器中培养一段时间。

　　定期抽取容器内的气体样本，使用GC分析其中CO₂的含量。

　　4. 商业化呼吸计

　　原理：一些专门设计的设备可以直接用于现场快速检测土壤微生物呼吸率，例如Yaxin-1102便携式光合作用/呼吸测定系统等。

　　操作步骤：

　　根据设备说明书准备土壤样品。

　　将样品放入设备指定位置，按照指示操作完成测量。

　　注意事项

　　测量前确保所有使用的器具都是干净且无污染的，以免影响结果准确性。

　　实验应在稳定环境下进行，避免外界因素干扰，如温度波动可能会影响微生物活动。

　　考虑到不同季节、土壤类型及管理措施对微生物活性的影响，在不同时间段重复实验可以获得更全面的数据。