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土壤脲酶(Urease)活性测定是评估土壤氮素转化能力、微生物活性及肥力状况的重要生化指标。脲酶能催化尿素水解为氨和二氧化碳,其活性高低反映土壤中氮素供应潜力和有机质代谢水平,常用于施肥效果评价、污染生态风险评估及土壤健康诊断。
标准方法(推荐)
1. 比色法(主流,灵敏度高)
依据标准:
《土壤农业化学分析方法》(中国科学院南京土壤研究所)
Hoffmann & Teicher (1961) 改良法(国际通用)
试剂:
底物:10% 尿素溶液(pH ≈ 7.0,用柠檬酸盐缓冲液配制)
终止剂:2 mol/L KCl 或 0.5 mol/L H₂SO₄
显色剂:苯酚-次氯酸钠(靛酚蓝法)或奈斯勒试剂(纳氏试剂)
操作步骤:
称取 5.0 g 新鲜土壤(过 2 mm 筛)于试管
加入 10 mL 10% 尿素溶液(含柠檬酸盐缓冲液,pH 6.8–7.0)
37°C 恒温培养 24 小时
加入 10 mL 2 mol/L KCl 终止反应,振荡过滤
取滤液,用 靛酚蓝法(630 nm) 或 纳氏试剂法(420 nm) 测 NH₄⁺-N 含量
设对照:用 0.5 mL 甲苯 抑制酶活,或用 灭菌土 作空白
2. 滴定法(传统,适用于高活性土壤)
原理:用标准酸吸收释放的 NH₃,反滴定
缺点:灵敏度低,操作繁琐,已较少使用
来源:网络
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