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土壤中过氧化物酶的测定操作步骤

2026-02-10

  土壤中过氧化物酶(Peroxidase, POD)是一种重要的氧化还原酶,广泛参与土壤有机质的降解、腐殖化过程及污染物(如酚类、芳香胺)的生物转化。其活性可反映土壤微生物活性、有机质状态及生态系统健康程度。

  操作步骤(参考 Guan et al., 1986;中国《土壤农业化学分析方法》)

  1. 样品准备

  取 新鲜土壤(避免冻融),过 2 mm 筛;

  称取 1.00 g 湿土(记录含水量,用于换算干重)。

  2. 酶反应

  试管中加入:

  土壤 1.00 g

  磷酸缓冲液(pH 6.0)2.5 mL

  0.5% 邻苯三酚 1.0 mL

  混匀后立即放入 30°C 恒温水浴;

  准确反应 30 分钟;

  加入 1.0 mL 1% H₂O₂,继续反应 30 分钟(总反应时间 60 分钟);

  加入 5.0 mL 95% 乙醇 终止反应;

  3000 rpm 离心 10 分钟,取上清液。

  3. 测定

  以 95% 乙醇调零,在 470 nm 处测吸光度(A);

  对照组:先加 H₂O₂ 再加邻苯三酚(或灭活土壤:80°C 烘 2 h)。

       来源:网络

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