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土壤过氧化氢酶(S-CAT)检测是评估土壤生物活性和氧化还原状态的重要指标,其检测方法主要包括分光光度法、气体体积法、电化学法及高锰酸钾滴定法等,具体如下:
一、常用检测方法
分光光度法
基于S-CAT催化过氧化氢分解的特性,通过测定240nm处吸光度变化计算酶活性。步骤包括:土壤样品与3% H₂O₂溶液混合反应,加入硫酸终止反应后过滤,测定滤液吸光度变化。
高锰酸钾滴定法
通过滴定反应后剩余的H₂O₂消耗量计算酶活性。具体步骤:土壤样品与H₂O₂反应后加入硫酸终止,过滤后以0.02mol/L KMnO₄滴定,活性以每小时消耗KMnO₄体积表示。
气体体积法
直接测定反应生成的氧气体积,适用于大批量样品检测,需使用气体体积计记录氧气生成量。
电化学法
利用电极检测反应中电流或电位变化,灵敏度高,适合微量样品分析。
二、实验注意事项
试剂准备:需精确配制3% H₂O₂溶液(需标定)及2mol/L H₂SO₄溶液,避免浓度误差影响结果。
温度控制:反应温度建议≤30℃,避免高温加速H₂O₂自发分解。
空白对照:需设置不加土壤样品的对照组,以校正背景干扰。
三、标准与规范
检测标准:参考宁夏地方标准(如DB64/T 1234-2020),明确样品处理、反应条件及结果计算流程。
数据表达:酶活性单位通常为μmol H₂O₂·g⁻¹·h⁻¹或mL KMnO₄·g⁻¹·h⁻¹。
来源:网络
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