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提取物中的铝可用原子吸收法(Webber,1974)、电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)(Carr 等,1991)或比色法(Hoyt 和 Webber,1974;Carr 等,1991)进行测定。原子吸收或 ICP-AES测定的是溶解的总铝含量,而比色法则是铝与显色剂“反应”后的结果。参与“反应”的铝的具体组分取决于显色需要的平衡时间。较短的反应时间主要测定不稳定单体铝,而较长的反应时间会测出聚合铝和络合铝。Grigg 和 Morrison(1982)指出邻苯二酚紫(PCV)方法在精度上优于铝试剂(金精三羧酸三铵盐),且自动化流程使其精度进一步提高。Conyers等(1991)也推荐采用PCV 法。以下方法改编自Wilson和 Sergeant(1963),提取流程简单可靠。
试剂
(1)0.1%(w/v)的 PCV。保存在棕色玻璃瓶中。
(2)0.1%(w/v)的邻菲罗啉(OP)。保存在聚乙烯瓶中。
(3)10%(w/v)的盐酸羟胺(HH)。保存在聚乙烯瓶中。
(4)10%(w/v)的醋酸铵(用醋酸把 pH 值调至 6.2)。保存在聚乙烯瓶中。
(5)铝标准溶液:由标准储备液(浓度18A1/L)配制,在与土壤提取液同浓度的 CaCl溶液中配制浓度为 100 mgA1,的标准溶液。通过进一步稀释,在相同摩尔浓度的 CaCk,溶液中配制5个 0.1~2.5 mgAI /L的标准溶液。对于森林土壤,标准溶液应用 0.01molL SrCl2,配制。
步骤
(1)吸取2ml的提取液或标准溶液到 16 mmx125 mm 的培养管中。培养管必须用 0.1 molL HCI预先洗涤。样品溶液中的铝含量不应高于5μg。
(2)按顺序添加 0.5 mL 的 PCV、OP 和 HH,每次加入后轻轻摇晃管中液体。对于每批样品,在加入每种试剂前应保证前一种试剂已加到所有管中。
(3)加入6ml的缓冲溶液,塞上塞子并倒转试管三次后静置1h。
(4)用分光光度计在 580 nm 波长下用1cm 的比色皿测量吸光度。绘制吸光度值-4g A1图。图中的μgA1值指土壤中的铝含量(mg/kg)。如果提取物经过稀释,则乘上稀释倍数。
来源:网络
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