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土壤蔗糖酶活性测定方法

2025-11-26

  土壤蔗糖酶活性的测定是一个非常重要的土壤生物学指标。蔗糖酶,也被称为转化酶,它能将土壤中的蔗糖水解为葡萄糖和果糖,这些产物是土壤微生物和植物的直接碳源和能源。因此,蔗糖酶活性直接反映了土壤的碳循环强度和生物学活性。

  方法 1:气量法(Gasometric Method)——经典、低成本

  原理

  用过量稀盐酸处理土壤,产生的 CO₂ 气体体积在量气管中直接读取,换算为碳含量。

  步骤简述:

  称取风干土样(通常 1–5 g,视碳酸盐含量而定);

  置于反应瓶,加入 6 mol/L HCl(确保过量);

  连接量气管(如 Jenkins 装置或改良式气量计);

  记录 CO₂ 气体体积(校正温度、大气压);

  按理想气体状态方程计算 C 含量。

  优点:

  设备简单(玻璃仪器即可);

  无需昂贵仪器,适合基层实验室。

  缺点:

  操作繁琐,精度受气密性影响;

  高黏粒土壤可能包裹碳酸盐,反应不完全。

  标准参考:

  Walkley & Black (1934) 改良法;

  中国《土壤农业化学分析方法》(鲁如坤主编)推荐气量法。

  方法 2:酸解-红外吸收法(Acidification–IR)——现代标准方法

  原理

  土壤样品在密闭反应器中与磷酸(H₃PO₄)或盐酸反应,释放的 CO₂ 由红外 CO₂ 分析仪(NDIR)实时检测。

  优势:

  自动化程度高(如 LI-COR LI-850、Elementar Soli TOC cube);

  灵敏度高(检出限 <0.1 g/kg);

  可同步测总碳(TC)和有机碳(SOC = TC – SIC)。

  操作流程:

  测总碳(TC):高温燃烧法(如 900°C);

  测无机碳(SIC):同一样品加酸释放 CO₂;

  有机碳(SOC) = TC – SIC。

  这是目前科研与标准检测(如 ISO、EPA)推荐的方法。

  标准依据:

  ISO 10694:1995 Soil quality — Determination of organic and total carbon after dry combustion(结合酸解测 SIC)

  EPA Method 9060A(固体样品总碳/无机碳)

  GB/T 39173–2020《土壤 无机碳的测定 酸解-红外吸收法》(中国国家标准)

  方法 3:重量法(Gravimetric Method)——较少用

  将释放的 CO₂ 用碱石灰或 Ascarite 吸收,称重增量;

  误差大、耗时长,已基本淘汰。

  方法 4:滴定法(Back-Titration)

  加入过量标准酸,反应后用 NaOH 回滴剩余酸;

  计算消耗的 H⁺ 量,推算 CO₃²⁻ 含量;

  易受土壤缓冲体系干扰(如黏粒、有机质),不推荐用于复杂土壤。

       来源:网络

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